Detection of Trypanosoma vivax in tissues of experimentally infected goats: what is the role of adipose tissue in the life cycle of this protozoon? / Detecção de Trypanosoma vivax em tecidos de caprinos experimentalmente infectados: qual é o papel do tecido adiposo no ciclo de vida desse protozoário?

Abstract Trypanosomiasis, caused by Trypanosoma vivax, is responsible for great economic losses among livestock in Africa and South America. During the life cycle of these parasites, they may present different morphological, metabolic and physiological characteristics depending on the interactions that are encountered at each point of their life cycle. Although T. vivax is frequently reported in the circulation of its mammalian hosts, it has the ability to migrate to the tissues of these individuals. However, this characteristic is poorly understood. In this context, we aimed to investigate the presence of T. vivax and the changes caused in different tissues of experimentally infected goats. Despite the animals were not perfused before tissues collection, using different approaches, we demonstrated its presence in different samples, including in the adipose tissue and skin of infected animals. In addition, a mononuclear inflammatory reaction, mostly characterized by an infiltrate of lymphocytes, plasma cells and macrophages were observed. The results highlight the possibility that, like other trypanosomatids, T. vivax may use these tissues during its life cycle. Future studies aiming to elucidate the length of time for which T. vivax remains active in these sites, and whether it uses these sites as a refuge from trypanocidal drugs, and whether it is capable of recolonizing the blood circulation, are much needed.

Resumo A tripanossomíase, causada por Trypanosoma vivax, é responsável por grandes perdas econômicas na bovinocultura da África e da América do Sul. Durante seu ciclo de vida, o parasita pode apresentar diferentes características morfológicas, metabólicas e fisiológicas em função das interações que ele encontra em cada ponto do seu ciclo. Embora o T. vivax seja reportado, frequentemente, na circulação dos seus hospedeiros mamíferos, o protozoário tem a capacidade de migrar para os tecidos desses indivíduos. Entretanto, essa característica é pobremente conhecida. Neste contexto, o objetivo foi verificar a presença, assim como as alterações causadas pelo T. vivax nos diferentes tecidos de caprinos experimentalmente infectados. Apesar dos animais não terem sido perfundidos antes da coleta dos tecidos, utilizando-se diferentes abordagens, foi evidenciada a presença do T. vivax em diferentes amostras teciduais, incluindo no tecido adiposo e pele dos animais infectados. Além disso, foi observada reação inflamatória mononuclear, caracterizada majoritariamente por infiltrado de linfócitos, plasmócitos e macrófagos. Os resultados evidenciam a possibilidade de que, assim como outros tripanossomatídeos, T. vivax pode usar esses tecidos durante o seu ciclo de vida. São necessários futuros estudos, objetivando elucidar o período em que o T. vivax permanece ativo nesses sítios, se ele utiliza esses locais como refúgio das drogas tripanocidas, e se ele é capaz de recolonizar a circulação sanguínea.

Seroepidemiology of Toxoplasma gondii in domestic cattle, sheep, goats and pigs from São Tomé and Príncipe / Soroepidemiologia de Toxoplasma gondii em bovinos, ovinos, caprinos e suínos domésticos de São Tomé e Príncipe

Abstract Despite the global importance of the zoonotic parasite Toxoplasma gondii, little is known regarding its infection in the Democratic Republic of São Tomé and Príncipe (DRSTP). This is the first report of antibodies to T. gondii in cattle, sheep, goats and pigs from the DRSTP. Antibodies were assessed by the modified agglutination test (MAT), with a cut-off titer of 100 for cattle and 20 for sheep, goats and pigs. The present study revealed an overall seroprevalence of 55.8%; 27.1% in 48 cattle, 68.4% in 98 sheep, 70.1% in 97 goats and 43.7% in 103 pigs. The south geographical area for cattle, the central area for sheep, and adult age and living in the central region for goats were found to be risk factors for seropositivity to T. gondii. These results support the scenario of a considerable presence of sporulated oocysts as well as of infected intermediate hosts in the local environment. Consumption of raw or undercooked meat should be considered as an important potential source of infection for animals and humans in the DRSTP.

Resumo Apesar da importância global do parasita zoonótico Toxoplasma gondii, pouco se conhece sobre sua infecção na República Democrática de São Tomé e Príncipe (RDSTP). Esse é o primeiro relato de anticorpos para T. gondii em bovinos, ovinos, caprinos e suínos da RDSTP. Os anticorpos foram pesquisados pelo teste de aglutinação direta modificada (TADM), com um título de corte de 100 para bovinos e de 20 para ovinos, caprinos e suínos. O presente estudo revelou uma soroprevalência global de 55,8%: 27,1% em 48 bovinos, 68,4% em 98 ovinos, 70,1% em 97 caprinos e 43,7% em 103 suínos. A área geográfica sul para os bovinos, a área central para os ovinos, bem como a idade adulta e a região central para os caprinos foram considerados fatores de risco para soropositividade a T. gondii. Esses resultados suportam o cenário de uma considerável presença de oocistos esporulados, bem como de hospedeiros intermediários infectados no ambiente local. O consumo de carne crua ou mal passada deve ser considerado como uma importante fonte potencial de infecção para animais e seres humanos na RDSTP.

Serological diagnosis and risk factors for Coxiella burnetii in goats and sheep in a semi-arid region of Northeastern Brazil / Diagnóstico sorológico e fatores de risco para Coxiella burnetii em caprinos e ovinos da região semiárida do nordeste do Brasil

Abstract Coxiella burnetii is a zoonotic agent transmitted mainly by small ruminants. In Brazil the disease has been classified as a notifiable disease since 2013, when human cases were reported. This study aimed to identify risk factors associated with the presence of anti- Coxiella burnetii antibodies in goats and sheep in a semiarid region of Northeastern Brazil. Sera of 412 goats and 403 sheep from municipality of Petrolina, Pernambuco, were examined by the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) against antigens of C. burnetii. Information about management variables (independent variables) that could be associated with the presence of the microorganism (dependent variables) were obtained from the supervisor of each farm. It was determined that 2.2% (9/412) of the goats and 2.1% (9/403) of the sheep had antibodies reactive to C. burnetii. The presence of anti-C. burnetii antibodies was associated with the dry area of the Sequeiro (a region in the northern part of the municipality of Petrolina) (P = 0.025), male sheep (P = 0.020), and intensive goat breeding (P = 0.005). This study therefore showed the presence of anti-C. burnetii antibodies in goat and sheep, confirming for the first time that this agent is likely circulating among goat herds in the Caatinga Biome, semi-arid of Brazil.

Resumo Coxiella burnetii é um agente zoonótico transmitido principalmente por pequenos ruminantes. No Brasil, a doença foi classificada como de notificação compulsória desde 2013, quando casos humanos foram relatados. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores de risco associados à presença de anticorpos anti-Coxiella burnetii em caprinos e ovinos em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Este estudo envolveu um inquérito sorológico de 412 caprinos e 403 ovinos em fazendas do município de Petrolina, no estado de Pernambuco. Os soros foram examinados pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) contra antígenos de C. burnetii . Informações sobre variáveis ​​de manejo (variáveis ​​independentes) que poderiam estar associadas à presença do microrganismo (variáveis ​​dependentes) foram obtidas do proprietário de cada fazenda. Foi determinado que 2,2% (9/412) dos caprinos e 2,1% (9/403) dos ovinos tinham anticorpos reativos a C. burnetii. A presença de anticorpos anti-C. burnetii foram associados com a área seca do Sequeiro (região no norte do município de Petrolina) (P = 0,025), ovinos machos (P = 0,020) e criação intensiva de caprinos (P = 0,005). Este estudo, portanto, observou a presença de anticorpos anti-C. burnetii em pequenos ruminantes, confirmando pela primeira vez que este agente pode estar circulando em rebanhos caprinos no bioma Caatinga, semiárido do Brasil.

Duplex nested-PCR for detection of small ruminant lentiviruses

Abstract Small ruminant lentiviruses (SRLV) have high genetic variability which results in different viral strains around the world. This create a challenge to design sensible primers for molecular diagnosis in different regions. This work proposes a protocol of duplex nested-PCR for the precise diagnosis of SRLV. The technique was designed and tested with the control strains CAEV Co and MVV 1514. Then, field strains were submitted to the same protocol of duplex nested-PCR. Blood samples of sheep and goats were tested with AGID and nested PCR with specific primers for pol, gag and LTR. The AGID results showed low detection capacity of positive animals, while the nested PCR demonstrated a greater capacity of virus detection. Results demonstrated that LTR-PCR was more efficient in detecting positive sheep samples, whereas gag-PCR allowed a good detection of samples of positive goats and positive sheep. In addition, pol-PCR was more efficient with goat samples than for sheep. Duplex nested PCR performed with standard virus samples and field strains demonstrated that the technique is more efficient for the detection of multiple pro-viral DNA sequences. This study demonstrated a successful duplex nested PCR assay allowing a more accurate diagnosis of SRLV.

Trombiculiasis in domestic goats and humans in the state of Maranhão, Brazil / Trombiculíase em caprinos domésticos e humanos no Estado do Maranhão, Brasil

Abstract Trombiculiasis is an infestation caused by larval mites (chiggers) of the family Trombiculidae. Here, we provide the first report on parasitism by the chigger species Eutrombicula alfreddugesi (Oudemans) and Eutrombicula batatas (Linnaeus) in goats and humans on farms in the state of Maranhão, northeastern Brazil. Severe itching and dermatitis caused by the chiggers' bites were seen. From a total of 779 examined goats, 214 of them showed clinical signs of infestation, as well as family members of three farms of the region. Most of the cases occurred during the rainy season, from March to September.

Resumo Trombiculíase é uma infestação causada por larvas de ácaros da família Trombiculidae. Nós reportamos pela primeira vez parasitismo por ácaros das espécies Eutrombicula alfreddugesi (Oudemans) and Eutrombicula batatas (Linnaeus) em cabras e humanos em fazendas no estado do Maranhão, nordeste do Brasil. Foram observadas dermatite e coceiras severas causadas pelas picadas de trombiculídeos. De um total de 779 cabras examinadas, 214 delas apresentaram sinais clínicos de infestações, assim como membros de três famílias de fazendeiros da região. A maioria dos casos ocorreu durante a estação chuvosa, de março a setembro.

Eimeria infections in goats in Southern Portugal / Infeções por Eimeria em caprinos do Sul de Portugal

Coccidiosis caused by Eimeria species is a major form of intestinal infection affecting intensively and semi-intensively reared goats. The province of Alentejo is the main goat-producing area in Portugal. Therefore, all 15 Serpentina goat farms in Alentejo were analyzed regarding the occurrence and diversity of Eimeria species. Fecal samples obtained from 144 animals (52.1% dairy goats, 47.9% pre-pubertal goats) were examined using the modified McMaster technique to determine the number of oocysts per gram of feces. Eimeria spp. oocysts were present in 98.61% of the fecal samples and, overall, nine different Eimeria species were identified. The most prevalent species were E. ninakohlyakimovae (88%) and E. arloingi (85%), followed by E. alijevi (63%) and E. caprovina (63%). The average number of oocysts shed was significantly lower in dairy goats than in pre-adult animals. Astonishingly, no clinical signs of coccidiosis were observed in any of the animals examined, even though they were shedding high numbers of oocysts and were infected with highly pathogenic species. Thus, implementation of routine diagnostic investigation of the occurrence and diversity of caprine Eimeria species may be a useful tool for determination and better understanding of their potential economic impact on goat herds in southern Portugal.

A coccidiose causada por espécies de Eimeria é a maior infecção intestinal que afeta regimes intensivos e semi-intensivos de caprinos. A região do Alentejo é a mais importante na indústria caprina em Portugal. Assim, todas as 15 explorações de caprinos da raça Serpentina do Alentejo foram analisadas para determinar a frequência e diversidade de espécies de Eimeria presentes. Amostras fecais de 144 animais (52,1% adultas, 47,9% jovens) foram examinadas com a técnica de McMaster modificada para determinar o número de oocistos por grama de fezes. Oocistos de Eimeria spp. estavam presentes em 98,61% das amostras fecais e nove espécies distintas foram identificadas. As espécies mais frequentes foram E. ninakohlyakimovae (88%) e E. arloingi (85%), seguidas por E. alijevi (63%) e E. caprovina (63%). A média do número de oocistos excretados foi significativamente menor em adultas do que em jovens. Surpreendentemente, não foram observados quaisquer sinais clínicos em nenhum dos animais examinados, apesar de eliminarem elevados números de oocistos e de estarem infectados com espécies altamente patogénicas. A prática de diagnósticos de rotina para identificação de espécies de Eimeria caprinas pode ser um importante instrumento para o melhor entendimento do nefasto impacto da doença em explorações de caprinos no Sul de Portugal.

Schmallenberg virus (SBV): aprendizajes y lecciones / Schmallenberg virus (SVB): learnings and lessons

En agosto de 2011 se produce en Europa un brote de una enfermedad desconocida en diferentes granjas de ganado vacuno en la localidad de Schmallenberg. Se realiza el alerta epidemiológico, y se comienza a seguir la evolución de la enfermedad. Para el desarrollo del trabajo se hace el seguimiento y análisis de la información producida por la Red PROMED de la International Society for Infectious Diseases. Del seguimiento se obtiene que en el término de 7 meses, 8 países reportan 3323 establecimientos con brotes de esta enfermedad afectando animales de diferentes especies; se diagnostica un nuevo virus que se lo denomina Schmallenberg. Con la definición de esta nueva enfermedad que por el momento no afecta a humanos se producen recomendaciones que hacen al virus, a la transmisión, al control y a la vigilancia epidemiológica.

Serological survey of Neospora caninum in small ruminants from Pernambuco State, Brazil / Inquérito sorológico de Neospora caninum em pequenos ruminantes do estado de Pernambuco, Brasil

Neospora caninum infection is an important cause of bovine abortion as well as neonatal mortality in goats and sheep. A serological survey for antibodies against N. caninum in goats and sheep was carried out in the municipality of Ibimirim, PE, Northeastern Brazil. The imunnofluoresce antibody test showed that 26.6 percent (85/319) of the goats and 64.2 percent (52/81) of the sheep were positive. Serologic reactivity was associated with age in goats (p < 0.01) and sheep (p > 0.05), with increasing rates in older animals. These results indicate exposure to N. caninum among small ruminants in the study area.

A infecção por Neospora caninum é uma importante causa de abortos em bovinos, assim como mortalidade neonatal em caprinos e ovinos. Uma pesquisa sorológica de anticorpos anti-N. caninum foi realizada no município de Ibimirim (PE, Brasil). Os resultados ao teste de imunofluorescência revelaram que 26,6 por cento (85/319) dos caprinos e 64,2 por cento (52/81) dos ovinos foram positivos. A reatividade à sorologia foi associada com a idade nos caprinos (p < 0,01) e ovinos (p > 0,05), com maior ocorrência nos animais mais velhos. Estes resultados indicam exposição a N. caninum entre pequenos ruminantes na área estudada.

Occurrence and risk factors associated with infection by Toxoplasma gondii in goats in the State of Alagoas, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Toxoplasma gondii em caprinos do Estado de Alagoas

INTRODUCTION: Goats are considered very susceptible to infection by Toxoplasma gondii and when this occurs during pregnancy, it may cause fetal death with subsequent fetal resorption, abortion, mummification, stillborn or the birth of weak goats. The objective of this work was to determine the occurrence of and identify risk factors for T. gondii infection in goats in different mesoregions in the State of Alagoas. METHODS: The research was conducted on 24 goat breeding farms in 10 municipalities. A total of 454 blood samples were examined for anti-T. gondii antibodies by indirect immunofluorescence antibody test. To evaluate the risk factors of toxoplasmosis in goats, questionnaires were applied analyzing the farm's production system and nutritional, reproductive and sanitary management. RESULTS: Disease occurrence was 39 percent with 95.8 percent of farms presenting seropositive animals. Significant associations were observed for mesoregion (OR = 0.23; 95 percentCI = 0.09 - 0.57), age (OR = 0.36; 95 percentCI = 0.20 - 0.64), semi-intensive herd management (OR = 8.70; 95 percentCI = 1.87 - 40.43), access of cats to water provided for goats (OR = 3.38; 95 percentCI = 1.89-6.02) and cats feeding on placental remnants (OR = 2.73; 95 percentCI = 1.38 - 5.40). CONCLUSIONS: Toxoplasma gondii infection is disseminated in the State of Alagoas and the adoption of a program that monitors infection foci is required to reduce the risk factors identified in the present study.

INTRODUÇÃO: Caprinos são considerados susceptíveis à infecção por Toxoplasma gondii que quando ocorre durante a gestação pode causar morte fetal com subsequente reabsorção, aborto, mumificação, natimortos ou nascimento de cabritos fracos. Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência e identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii em caprinos nas diferentes mesorregiões do Estado de Alagoas. MÉTODOS: A pesquisa foi realizada em 10 municípios, sendo analisadas 24 propriedades de produção caprina com aptidão mista. Foram coletadas amostras sanguíneas de 454 animais para realização da pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii através da prova sorológica de imunofluorescência indireta. Para o estudo dos fatores de risco, foram aplicados questionários com questões referentes ao sistema de produção e manejos nutricional, reprodutivo e sanitário. RESULTADOS: A ocorrência encontrada foi de 39 por cento com 95,8 por cento das propriedades apresentando animais positivos. Foi observada associação significativa para as variáveis: mesorregião (OR = 0,23; IC 95 por cento = 0,09 - 0,57), idade (OR = 0,36; IC 95 por cento = 0,20 - 0,64), sistema de criação semi-intensivo (OR = 8,70; IC 95 por cento = 1,87 - 40,43), acesso dos gatos à água fornecida aos animais (OR = 3,38; IC 95 por cento = 1,89 - 6,02) e gatos se alimentando de restos placentários (OR = 2,73; IC 95 por cento = 1,38 - 5,40). CONCLUSÕES: A infecção por T. gondii está disseminada no Estado de Alagoas, sendo necessária a realização de um programa de monitoramento dos focos da infecção no Estado com objetivo de reduzir os fatores de riscos identificados no presente estudo.

Comparative efficacy of standard AGID, CCIE and competitive ELISA for detecting bluetongue virus antibodies in indigenous breeds of sheep and goats in Rajasthan, India

The sero-prevalence of antibodies against blue tongue virus (BTV) in 408 local breeds of sheep in Rajasthan state in India was investigated using standard agar gel immunodiffusion (AGID) test. Maximum seropositivities of 11.3% (13/115), 10.7% (13/121), 7.1% (11/155) and 5.9% (1/17) were recorded in the Chokla, Magra, Nali and Pugal breeds, respectively. Out of 107 goat serum samples, 6 (5.6%) were AGID positive. The performance of the standard AGID, counter current immuno-electrophoresis (CCIE) and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) for the detection of serum antibody against BTV in indigenous breeds of sheep were compared. Out of 178 sheep serum samples tested, 17 (9.5%), 22 (12.3%) and 54 (30.3%) were positive for group-specific bluetongue antibodies by AGID, CCIE and cELISA, respectively. There was appreciable difference in the seroprevalence detected by AGID, CCIE and cELISA in clinically healthy and diseased sheep with regard to relative sensitivities and specificities of the tests with cELISA being highly sensitive and specific followed by CCIE and AGID test. It was concluded that these indigenous breeds of sheep may be a potential reservoir of BTV infection and cELISA should be routinely used for the detection of antibodies against BTV in these local breeds of sheep.

Diferenciaçäo de tipos de Mycoplasma mycoides na etiopatogenia da micoplasmose caprina / Differentiation of Mycoplasma mycoides types on the etiopathogeny of goat mycoplasmosis

Dentre as várias espécies e subespécies de micoplasma, isoladas de caprinos, Mycoplasma mycoides subesp. mycoides e M. mycoides subesp. capri, säo considerados importantes patógenos, por produzirem doenças com diversas manifestaçöes clínicas (infecçöes sistêmicas, pneumonia, artrite, agalaxia etc.). O propósito desse estudo foi pesquisar a presença dessas subespécies em caprinos com diagnóstico de micoplasmose, oriundos de uma propriedade localizada em Nova Friburgo, município do estado do Rio de Janeiro. Na coleta de espécimes para o diagnóstico, usou-se o método de lavagem do conduto auditivo externo de 20 animais, utilizando-se o meio líquido de Hayflick. Após a obtençäo dos lavados de ouvido, as amostras foram cultivadas segundo os procedimentos padröes. Os cultivos foram examinados em microscópio estereoscópico, visando a observaçäo de colônias típicas de micoplasma. Essas colônias foram coradas pelo método de Dienes, submetidas aos testes de sensibilidade à Digitonina e Imunoperoxidase Indireta (IPI), para posterior identificaçäo. Todos os caprinos examinados apresentaram cultivo positivo para Mycoplasma spp., i.é, 100 por cento (20/20) e desses, 80 por cento (16/20) foram positivos para M. mycoides. Das amostras positivas para M. mycoides, 70 por cento (14/16) o foram para M. mycoides subesp. mycoides tipo Colônia Grande (®Large Colony-LC¼), 45 por cento (9/16) para M. mycoides subesp. mycoides tipo Colônia Pequena (®Small Colony-SC¼) e 70 por cento (14/16) para M. mycoides subesp. capri, onde 12 dos 16 caprinos examinados portavam mais de uma subespécie e/ou tipo no conduto auditivo. No presente estudo foram encontrados micoplasmas com características de ambas as subespécies e tipos (LC e SC), no conduto auditivo externo de caprinos, sugerindo a necessidade de estudos adicionais para elucidaçäo da etiopatogenia das micoplasmoses caprinas.

Diagnosis of caprine toxoplasmosis by a dot enzyme-linked immunosorbent assay

Foi avaliada a reaçäo imunoenzimática dot-ELISA, no imunodiagnóstico da toxoplasmose caprina, considerando a reaçäo de Imunofluorescência Indireta (RIFI) como reaçäo de referência. Para a avaliaçäo da dot-ELISA discos de nitrocelulose foram sensibilizados com 0,1 microgramas de proteína/ml de uma soluçäo antigênica obtida através da sonicaçäo de taquizoitas de Toxoplasma gondii. Esta concentraçäo antigênica foi considerada ótima na discriminaçäo de soros reagentes e näo reagentes. Foram testadas 169 amostras de soro, destas 115 (68 por cento) foram reagentes a antígenos de T. gondii, com títulos de anticorpos variando entre 1/16 e 1/16:384, quando testadas através da reaçäo de Imunofluorescência Indireta (RIFI); na dot-ELISA, 119 (70 por cento) foram positivas, com título variando entre 1/16 e 1/65.536. A comparaçäo entre as técnicas mostra os seguintes índices: co-positividade (sensibilidade) 0,89, co-negatividade (especificidade) 0,98, e Youden (concordância) 0,93, quando foi utilizado o título de 1/16 como discriminatório de reaçöes positivas e negativas. Utilizando como discriminatório o título de 1/64, os índices calculados foram co-positividade 0,97, co-negatividade 0,96 e Youden 0,93. Os resultados mostram a possibilidade da utilizaçäo da dot-ELISA no imunodiagnóstico da toxoplasmose caprina. A introduçäo desta reaçäo no imunodiagnóstico da toxoplasmose seria de grande importância, principalmente em estudos soro-epidemiológicos, já que a técnica pode ser realizada sob condiçöes de campo, pois nenhum equipamento especial é requerido para a sua execuçäo

Toxoplasmose experimental em cabras gestantes / Experimental toxoplasmosis in pregnant goats

Onze cabras gestantes sem raça definida foram inoculadas pela via subcutânea com 10 elevado à sétima potência taquizoítos de uma cepa de virulência moderada do Toxoplasma gondii (CA). Duas cabras gestantes foram usadas como controle näo inoculados. Foi observado transmissäo congênita do T. gondii em sete das oito cabras inoculadas entre o 52§ e o 67§ dia de gestaçäo (cinco abortos e dois partos normais com filhotes debilitados). Três cabras inoculadas entre o 100§ e o 133§ dia de gestaçäo pariram crias aparentemente normais, apesar da ocorrência de transmissäo congênita em um dos animais. Foi possível ainda evidenciar a transmissäo congênita do parasita em uma entre quatro cabras avaliadas em duas gestaçöes sucessivas. As cabras controle pariram crias aparentemente normais, não infectadas pelo T. gondii